Número 44

enfermedades cutáneas. Aunque el lipidoma superficial está bien descrito, el perfilado molecular del estrato córneo (EC) sigue limitado, dificultando la detección temprana de disfunción de barrera, irritación e inflamación subclínica. Los avances recientes, especialmente el tape stripping + HRMS + análisis multiómico y bioinformático, para evaluar penetración y respuesta metabólica temprana permiten analizar capas del EC y describir gradientes de distribución y transformación lipídica. Este enfoque cuantifica más de 900 especies lipídicas con alta resolución. A partir de ello se ha desarrollado un protocolo refinado, útil en estudios funcionales y traslacionales y en evaluación de cosméticos. Monitorizando la difusión de formulaciones tópicas a través del EC se puede medir su rendimiento. Además, los lípidos oxidados en EC superficial pueden indicar presencia bacteriana y/o estrés oxidativo. También se incorpora el análisis del ácido urocánico (UCA), asociado a inflamación y fotodaño. La estrategia emplea un “ fingerprinting ” multidimensional (masa exacta, MS/MS y tiempo de retención) apoyado por machine learning dentro de oloMAP, y se realiza con UPLC-Q-TOF-MS. El objetivo del estudio es evaluar la penetración y el efecto temprano de una formulación rica en ceramidas sobre el lipidoma y metaboloma del estrato córneo. MATERIALES Y MÉTODOS Diseño del estudio y consideraciones éticas Se llevó a cabo un estudio piloto con diseño controlado intraindividual en siete voluntarias sanas (mujeres, 22–29 años) sin patologías dermatológicas, enfermedades sistémicas ni alergias conocidas a ingredientes cosméticos, que aplicaron una cantidad estandarizada (0,5 mg/cm²) de loción con ceramidas dos veces al día, en un área definida del antebrazo durante 1 semana. Se realizaron evaluaciones en tiempo inicial (T0) y tras 7 días (T7). Como control intraindividual se empleó un área equivalente no tratada en el antebrazo contralateral (T7C), permitiendo la comparación directa dentro de cada participante y reduciendo la variabilidad interindividual. La elección de una cohorte joven y homogénea minimizó factores de confusión asociados a la edad. El periodo de 7 días se seleccionó para evaluar cambios lipídicos tempranos. Todos los procedimientos se realizaron conforme a la Declaración de Helsinki y a los criterios aplicables a ensayos cosméticos establecidos en el Reglamento (CE) Nº 1223/2009. Reactivos La loción utilizada contiene ceramidas NP, AP y EOP, además de otros componentes de soporte de barrera e hidratación, etc. Los disolventes y modificadores para extracción y UHPLC-MS se adquirieron a VWR. El estándar interno deuterado SPLASH® LIPIDOMIX® se obtuvo de Avanti Polar Lipids. Muestreo, extracción y análisis LC-MS Las tiras se almacenaron a −80 °C. La extracción lipídica se realizó con metanol frío, agitando 1h a 4 °C. Posteriormente, se efectuó extracción bifásica con MeOH 10% y MTBE. Se evaporó una alícuota de la fase orgánica y otra de la fase acuosa y se reconstituyeron en MeOH y en una solución de ACN y H2O. El análisis se realizó en un UHPLC 1290 Infinity II (Agilent) acoplado a un 7600 Zeno- TOF (SCIEX). Procesado de datos y análisis Los datos se procesaron con oloMAP. La identificación se basó en masa exacta, tiempo de retención y MS/ MS frente a una base de datos interna. La validación y cuantificación relativa se apoyó en 69 estándares deuterados de 14 clases lipídicas; las clases no relacionadas se normalizaron al estándar de ceramida C16. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Para evaluar la penetración y el impacto funcional de la formulación rica en ceramidas, se realizó un perfilado lipídico inicial (T0) y tras 7 días (T7). Se detectaron 969 especies lipídicas en todas las muestras, incluidas ceramidas, ácidos grasos y lípidos bioactivos minoritarios. El análisis de clustering jerárquico mostró que las muestras tratadas (T7) formaron un clúster diferenciado, separado de T0 y del control (T7C), principalmente debido al remodelado de esfingolípidos (ceramidas) y glicerofosfolípidos. En cambio, T0 y T7C (control) permanecieron similares, indicando escasa deriva sin tratamiento. Las variaciones en los lípidos prenoles en ambos grupos sugieren una respuesta endógena, probablemente influida por exposición UV. Los cambios en esteroles serían coherentes con el recambio epidérmico y la reparación. La abundancia acumulada de ceramidas de cadena larga (≥ C34) en el estrato córneo aumentó notablemente tras 7 días de aplicación frente a la línea inicial (T0) y a las zonas no tratadas (control T7). La loción también afectó a las ceramidas de cadena más corta. Dado que niveles elevados de ceramidas largas (C > 34) mejoran la organización lamelar del estrato córneo, fortalecen la barrera, reducen la pérdida transepidérmica de agua y favorecen la hidratación, estos resultados sugieren que la formulación 93 VERANO 2026 INDUSTRIA COSMÉTICA 044 outsourcing